Mediu Ploskireva (Bacto-agar F): descriere. microbiologiei medicale

mediu Ploskireva (denumit în continuare încă Bacto agar F) este un mediu nutritiv pentru cultivarea unor microorganisme, în principal Shigella și Salmonella. Ca o sursă pentru materialele ei de a folosi infectate: urină, bilă, fecale.

poveste

Nikolay Ivanovich Ploskirev - microbiolog sovietic și doctor emerit. El a fost născut în 1869 și a murit în 1948, după ce a lucrat cea mai mare parte a vieții în orașul său natal - Tomsk.

În 1888, el, omul de știință viitor, fără să se termine clasa a șasea de școală, a intrat în armată. el a fost capabil să completeze formarea numai în 1892, apoi a trecut examenele pentru admiterea la Tomsk Imperial University, a studiat la Facultatea de Medicină. În 1898 a primit titlul de doctor.

Ploskirev a participat la războiul ruso-japonez, și după ce a lucrat în spital Tomsk. În 1910 a fost numit în postul de șef al spitalului dermatologice si venerice Tomsk, iar timp de treizeci de ani a fost capul său permanent. Același om de știință a fost unul dintre fondatorii clinicii ITS din Tomsk.

Nikolay Ivanovich Ploskirev a scris o serie de lucrări dedicate luptei împotriva bolilor venerice.

structură

Miercuri Ploskireva - materiale pentru cultivarea bacteriilor intestinale și, prin urmare, trebuie să conțină mai multe tipuri de nutrienți. Este produs în formă uscată.

Destul de o mare parte din greutatea sa totală este de sprot hidrolizatul pancreatic (10,4 g / l). Puțin mai puțin reprezentat de sodiu dibazic hydrocitrate (8,5 g / l). De asemenea, există un bulion nutritiv și zahărul din lapte (8,62 și 7,3 g / l) uscat.

Al doilea titlu Mediul Ploskireva - J. Bacto-agar-agar în compoziția este prezentă într-o cantitate de agar, 6,94 g / l. Seriovatistokislogo conținut de sodiu anhidru egal cu 5,1 g / l. Există prezența fosfatului disodic anhidru - 2,1 g / l, săruri de sodiu ale acidului colic circa 3,46 g / l și carbonat de sodiu - 2,4 g

Mai puțin de un gram pe care le conține indicatori - roșu neutru (0,05) și verde strălucitor (0,0002). Conținutul de iod - 0,13.

cerere

Studiul proceselor biochimice ale bacteriilor joaca un rol foarte important în diagnosticul bolilor care cauzează organisme anaerobe. Specii în această familie - sute. Ele sunt aproape identice în morfologie și proprietăți culturale, și modul cel mai de încredere pentru a le deosebi unul de altul - este studiul de biochimie.

Studiul începe cu inocularea materialului patologic în mediul de cultură. Ea a diferențialului patologice pentru bacterii coliforme și o parte din ea, în plus față de agar simplu, include lumină și lactoză. Capacitatea de procesare de lactoză - un semn important de diferențiere a enterobacterii. Dacă acest lucru este descoperit, pH-ul se schimbă spre aciditate și indicatorul este activat, care se transformă în colonie.

Alte țări pot utiliza alte suporturi de nutrienți, dar mecanismul lor de acțiune corespunde cu cele trei cele mai frecvente în Rusia - acest mediu Endo și Levine Ploskireva miercuri.

Descrierea metodei

În străinătate medie Ploskireva analogic este un așa-numit MacConkey Agar. În soluție transparentă formă finită are o culoare roz-galben deschis. Coloniile capabile să proceseze lactoza, printre Ploskireva da roșie (merișor) culoare. În cazul în care bacteriile nu pot procesa sau colonie este incoloră sau are o culoare slab.

Dat fiind faptul că compoziția mediului include substanțe inhibitori Ploskireva (verde briliant, săruri biliare, iod), se inhibă aproape complet creșterea florei gram - pozitive, ca și în prima zi eshehiry retardati semnificativ creșterea, precum și alte microflorei concomitente de obicei.

al doilea picior

De un interes deosebit este selectarea coloniei și se însămânțează pe un mediu de stocare primară și diferențierea. Mediul în care se însămânțarea trebuie să conțină mai multe substraturi. Cultura bacteriană ar trebui să detecteze activitatea enzimatică cu privire la acestea, în același mediu plasat în tuburi, astfel încât există două site-uri:

• una în care agarului înclinată;
• cu o coloană.

Interesul cercetătorilor din colonie populate porțiune teșită cursa densă și într-o coloană - un imbecil. În această etapă, mediul folosit Russell, Kligler sau Olkenitskogo. Ca diagnostic diferențial utilizate și Ploskireva miercuri.

Microbiologie și patogene organisme

Agar Ploskireva este un factor important în detectarea infecțiilor cauzate de enterobacterii. Deci, de exemplu, este cultivat și colonii de microorganisme care provoacă dizenteria bacilară diferențiate. Acest organisme anaerobe care aparțin genului Schigella.

La fel ca toți cei care face parte dintr-o familie de bacterii intestinale, Shigella au forma de tije, dimensiunea de două micrometri. Ele nu constituie capsule și spori au flageli - le permite să fie distinsă de Salmonella, care, la rândul lor, sunt mobile. Ele cresc bine pe majoritatea mediilor simplu, la o temperatură ușor peste temperatura ambiantă (35-37 ° C) și pH 7,4. Prin natura de creștere, coloniile nu diferă de Salmonella.

Așa cum sa discutat mai sus, microorganismele pot fi diferențe morfologice substanțial, cu toate acestea, variază semnificativ în procesele biochimice ale vieții. Astfel, cu excepția Shigella Nyukestl, fără formarea de gaz de acid se produce în timpul fermentației glucidelor. Cu excepția Shigella sonnei, ei nu pot fermenta lactoza, dar este digerat glucoza. Doar la caracteristicile lor cheie, le puteți transporta ceea ce pot pentru a reduce niraty la nitrit. coloniile au fost digerate cu uree, precum și în mediul de cultură este nici lichefierea gelatinei.

Colectarea și pregătirea semințelor

Pentru a detecta agenți de dizenterie, sunt necesare teste microbiologice medii infestate, adică fecale pacientului. La primirea materialului, aveți nevoie de cât mai repede posibil pentru a face semănatul. Dacă acest lucru nu este posibil, sursa trebuie să fie plasată într-un conservant - amestec tampon fosfat sau glicerol. La 4 ° C, acestea pot fi depozitate pentru mai mult de o zi. Se colectează materialul trebuie să fie efectuată cu ajutorul unui tub de sticlă rectal, care este introdus in rect.

Pentru studiile dintr-un material selectat piese purulent mucus care trebuie spălate în două până la trei tuburi de soluție de clorură de sodiu izotonică.

Aplicarea bacteriilor patogene din mediul Ploskireva făcut spatulă de sticlă. Ai nevoie pentru a freca pe o porțiune mică de agar său, apoi se rupe pe spatula asupra mediului, iar materialul rezidual este frecat în suprafața semănată. În cazul în care însămânțarea se face în câteva cupe, apoi la fiecare dintre ele trebuie să planteze un nou lot.

În cazul în care piesele muco-purulent acolo în a lua o analiză dedicată, aceasta nu înseamnă că nu există nici o prezență a agenților patogeni. Într-un astfel de caz, este necesar să se emulsionează fecale în 10 ml de clorură de sodiu (concentrație 0,85%) și apoi semene una sau două picături pe un mediu Ploskireva. Scaun neemulsionate pot fi semănate în bulion selenitovy. De asemenea, el a folosit, în cazul în care, în loc de fecale sunt voma sau spalari.

diagnosticul microbiologic

În prima etapă a studiilor microbiologice efectuate însămânțarea de bacterii patogene în două cupe, apoi sa ma uit cum să crească Shigella. Miercuri Ploskireva a produs o cultură, iar al doilea - asupra mediului sau Endo Levin.

Datorită faptului că au existat tulpini de Shigella sunt rezistente la antibiotice, la mediul a fost suplimentat cu cloramfenicol. Apoi, are loc în câteva zile de incubare într-un incubator la 37 ° C

În a doua zi pentru a explora coloniile crescute. Cei care nu sunt pe mediu de diagnostic diferential crescut incolor, este necesar să se índepărta mediu sau scurt Russell „rândul pestriță.“ Cercetari suplimentare se desfasoara prin algoritmul culturilor primare pe ele. Coloniile de Shigella, miercuri, Ploskireva cresc sub formă de coloane transparente, incolore și mici. Ele sunt de două tipuri:

• aplatizată cu margini zimțate;
• rotunjit, convex, cu un luciu tipic umed.

Trei sau patru colonii trebuie mikroskopirovat și examinate pentru mobilitate. În cazul în care acesta din urmă nu apare, au mutat miercuri Olkenitskogo pentru a izola o cultură pură. În absența unor colonii caracteristice Shigella sau în cazul în care nu se observă o creștere la toate, este necesar să Endo agar sau Ploskireva produc însămânțare de bulion selenitovogo. În cazul în care coloniile tipice sunt prezente în număr suficient, a pus aglutinarea estimat. Un amestec de seruri sonnei și Flexner, reacția are loc pe sticlă.

cercetări suplimentare

În a treia zi, există schimbări care au avut loc în coloniile de pe mediul Russell. Dacă există o cultură care nu degradează lactoza și glucoza fermenți pentru a produce un acid, acesta este separat și analizat, petrece microscopie, precum și să efectueze însămânțarea în „rândul pestriță“, dar de data aceasta sa extins. Pune doar reacția de aglutinare, în vederea identificării serologice.

În ultima zi, se poate concluziona, pe baza schimbărilor în „numărul pestriță“ (în cazul în care există fermentarea glucidelor), precum și rezumă reacția de aglutinare.

Depozitare și preparare

Prepararea agar Ploskireva are loc după cum urmează:

1. 55 g substanță uscată se agită într-un litru de apă distilată.
2. Fierte timp de două până la trei minute, până când agar încă nu este complet topit.
3. Se toarnă în vase Petri (opțional sterilitate) strat de 5-6 mm.
4. Plăcile sunt lăsate deschise pentru o jumătate de oră la temperatura camerei (18-25 grade). După acest timp mediul este suficient sa se intareasca si uscat.

Miercuri Ploskireva fotosensibilă și higroscopice. Pulberea trebuie depozitată într-un pachet sigilat, umiditatea relativă din cameră nu trebuie să depășească 60%. Temperatura optimă pentru stocarea de 2 ° C până la 25 ° C Depozitarea trebuie să se conformeze acestor norme, în caz contrar posibile constatări inexacte.